CDS的全稱是指編碼序列。在自然翻譯過程中,只翻譯CDS,這意味著大部分蛋白質的CDS以AUG(起始密碼子,設計引物時使用ATG)開始,以UAG、UAA、UGA(終止密碼子,設計引物時使用TAG、TAA、TGA)結束。妳設計引物的目的是為了最終表達這種蛋白酶嗎?如果有,就按照CDS設計引物,我敢保證沒有問題。CDS的上遊和下遊序列在基因工程表達中是無用的。看公司設計的引物是不是從CD兩端設計的。如果上遊引物能匹配CDS的前22個堿基,說明上遊引物沒問題。
還有壹點妳要註意,如果妳以後要表達的表達載體是純化用的HIS*6標簽,妳需要看看下遊引物擴增的目的片段中是否有終止序列。如果有,那麽HIS*6標簽在以後的表達中就無法與妳的目的基因融合,也就是說妳表達的蛋白無法被鎳層析柱純化。
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