2.原核生物中mRNA結合小亞基的每個mRNA的5’-末端有壹個核糖體結合位點，這是壹個富含嘌呤的序列，由AUG上遊8-13核苷酸的4-6個核苷酸組成，也稱為SD序列。該序列正好與30S小亞基中16s rrna 3’端序列的壹部分互補。所以SD序列也叫核糖體結合位點，RBS)。緊鄰SD序列的短核苷酸可以被核糖體小亞基蛋白識別。原核生物通過這種核酸-核酸和核酸-蛋白質的識別組合，將mRNA結合到核糖體的小亞基上。結合反應需要IF-3和IF-1的參與。
3.甲酰甲硫氨酸-tRNA的結合在IF-2的作用下，fMet-tRNA與mRNA分子中的AUG結合，即密碼子與反密碼子配對，這需要GTP和Mg2+。
4.核糖體大小亞基與fMet tRNA結合後，IF-3與小亞基分離。隨著IF-3的脫離，核糖體50S的大亞基與核糖體30S的小亞基結合形成70S的初始復合物。同時GTP被水解，IF-1和IF-2從起始復合物中分離出來，甲酰硫基-tRNA占據了P位，A位為空，因此與起始復合物有關。