蛋白質組是基因組的直接產物。由於基因剪接和翻譯後修飾,壹個蛋白質組中蛋白質的數量可能超過基因提供的數量,蛋白質組中大多數功能蛋白質的表達豐度較低,因此直接用質譜(MS)分析裂解物是不現實的。在此之前,有必要對復雜的細胞裂解物進行分離和純化。目前,親水作用液相色譜(hilic)廣泛應用於蛋白質的研究和制備,是生物大分子特別是蛋白質分離、純化和分析的壹種新的有力工具。1的基本原理。HILIC技術1.1HILIC技術的特點是使用親水性固定相和疏水性流動相,主要通過固定相與溶質的親水性相互作用來完成分離。親水性固定相可以富集緩沖液中的水分子,從而在固定相表面形成水層,親水性溶質分布在水層和疏水性洗脫液之間。在HILIC [1]中,流動相是含有少量水性產物/極性溶劑的有機溶劑,有機組分是弱洗脫劑,水相是強洗脫劑。最終的分離是通過洗脫液與固定相之間的靜電相互作用來競爭親水性溶質與固定相的結合位點或與固定相形成氫鍵,使溶質被洗脫,通過提高流動相的親水性來完成洗脫..............
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請參考:
親水作用色譜:/113614/
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