2018檢驗技術員備考資料(10)
免疫佐劑的類型
1.具有免疫原性的佐劑:如卡介苗、枯草桿菌、短小棒狀桿菌、百日咳桿菌、脂多糖、細胞因子等。
2.無免疫原性的佐劑:如氫氧化鋁佐劑、磷酸鋁、磷酸鈣、石蠟油、羊毛脂、表面活性劑、海藻酸鈣、多核苷酸、細胞壁肽等。
弗氏佐劑和細胞因子佐劑應用最廣泛。
(1)弗氏佐劑:有完全弗氏佐劑(石蠟油+羊毛脂+卡介苗)和不完全弗氏佐劑(石蠟油+羊毛脂)兩種。弗氏完全佐劑可提高佐劑療效,但註射後易產生局部持續性潰瘍和肉芽腫,應引起重視。
(2)細胞因子佐劑:細胞因子佐劑與抗原結合,能有效刺激機體的免疫功能。常用的有IL-2、IL-1、IFNγ、IL-12、GM-CSF。細胞因子佐劑也廣泛用於腫瘤基因治療。
血清結合珠蛋白的測定
正常範圍:火箭電泳:1.0 ~ 2.7g/L放射免疫測定:0.8 ~ 2.7g/L血紅蛋白結合方法:0.3 ~ 2.0g/L檢查介紹:觸珠蛋白是肝臟合成的糖蛋白,能與血漿中的血紅蛋白結合形成穩定的復合物。
臨床意義:該檢測主要用於反映是否發生溶血。
在創傷、腫瘤、系統性紅斑狼瘡、類固醇使用、膽道梗阻、妊娠、口服避孕藥等疾病中發現了血清結合珠蛋白的升高。
血清結合珠蛋白的減少可見於各種溶血、肝細胞病變、先天性結合珠蛋白缺乏、巨幼細胞性貧血和組織出血。
斑點免疫層析試驗
(1)原則
斑點免疫層析(ICA)也是基於硝酸纖維素膜,但它利用微孔膜的毛細作用,滴在膜壹端的液體慢慢遷移到另壹端,就像層析壹樣。
(2)試劑和操作
免疫層析測試以單克隆抗體夾心法為例。實驗所用試劑均為幹試劑,多種試劑組合在壹條約6mm×70mm的塑料條上,形成單個試劑條。試劑條的上端(a)和下端(b)分別粘貼有吸水材料,免疫金復合物幹片粘貼在靠近下端(c)處,硝酸纖維素膜條與之緊密貼合。硝酸纖維素膜條上有兩個反應區,測試區(T)包被有特異性抗體,參考區(R)包被有抗鼠IgG。
測量時,試紙下端浸入液體樣品中,下端的吸水材料吸收液體,向上端移動。當它流過C時,幹片劑上的免疫金復合物被重新溶解,並被驅使向膜條遷移。如果標本中待檢測的特異性抗原能與當時免疫金復合物的抗體結合,則抗原抗體復合物在流到檢測區時會被固相抗體獲得,膜上會出現壹條紅色的反應線(T)。多余的免疫金復合物繼續向前移動,直到參照區與固相鼠IgG結合(免疫金復合物中的單克隆抗體為鼠IgG),出現紅色質控線(R)。相反,陰性樣品沒有反應線,只顯示質控線。
斑點免疫層析試驗在試劑形式和操作步驟上比上述免疫分析方法簡單,只需壹種試劑,只需壹步操作。