使用釀酒酵母基因組通過PCR獲得SBP1和STM1的編碼序列。PCR產物分別在59和39的末端具有NdeI和XhoI的尖銳位點。片段被限制成pET- 15b，並作為His6-添加到Sbp1p和Stm1p上。標簽的表達產生了pET-SBP1和pET-STM1質粒。HMT1可在實驗室獲得(Chern等人，2002年)。將其插入到pBS-MP中(Hwang等1999)。E.***高蛋氨酸氨肽酶((MAP))基因((pBS-MAPp-hmt1)沒有改變。從PBS-MAPP-HMT1擴增STM1基因的啟動子序列，並將終止密碼子為11核苷酸39的pGEX-STM1質粒插入NotI。STM1在壹輛雙輪馬車裏，兩匹馬排成壹排。和HMT1基因是在那時，利用分別具有NdeI和BamHI的位點59和39的初始知識，將PCR產物以STM1作為起始密碼子連接在59的末端，並成為pET-15b載體，以產生pET-STM 1-((MAPP-HMT 1))。編碼His6標簽pET-15b的載體序列位於NcoI和NdeI位點之間。因此，STM1被表達為由T7啟動子控制的N-末端His6- tag融合蛋白。最後，在PET-STM1-(MAPP-HMT 1)WAS上，用SBP1而不是Sbp1p/hmt1產生STM 1((PET-SBP1-[MAPP HMT 65438]精氨酸殘基在所有表達質粒的凝血酶切割位點上如上所述(PET-SBP 1，PET-STM 65438凝血酶切割位點並產生STM 1 R236k、R237k、R240K和R243K突變體的位置-通過位置定向快速改變的定向突變形成根據制造商的說明，形成突變元件((Stratagene). e . * * * Tongli bl 21((DE3)細胞用作蛋白質表達的宿主。直到培養物在600 nm處達到0.6的光吸收率，用質粒轉化的細胞在30℃下在Lauia的肉湯中生長。然後加入異丙基B-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG，1 mM終濃度)，細胞在收獲前培養4小時。細胞裂解後，根據制造商的說明，用Ni2螯合珠(Novagen)親和純化重組蛋白。
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