蛋白質必須先水解成氨基酸,而蛋白質種類繁多,是因為其數量大,結構復雜,空間結構千變萬化。基礎氨基酸只有20,重組後可能變成完全不同的東西,控制與之前完全不相關的代謝過程。
基因重組只是控制同壹性狀的不同表達,不會改變性狀的基本情況。比如控制眼睛顏色的基因,父母基因重組後,父母可能是黑色的,他們的後代會是藍色的。但是從來不控制眼睛顏色的基因重組後變成了控制耳朵的基因。
重組疫苗和基因疫苗(核酸疫苗)有什麽區別?
重組疫苗是通過基因工程技術制成的,如將編碼HBSAg的基因插入酵母基因組,制成重組乙肝疫苗。
重組疫苗:通過基因重組技術生產的疫苗。
DNA疫苗:通過導入外源DNA表達蛋白的疫苗基因疫苗,將編碼外源抗原的基因插入到含有真核表達系統的載體中,然後直接導入人或動物體內,在宿主細胞中表達抗原蛋白,可直接誘導機體的免疫反應。抗原基因在壹定時間內的持續表達,不斷* * *人體的免疫系統做出反應。
DNA疫苗:通過導入外源DNA來表達蛋白質的疫苗。
重組蛋白是用dna還是rna?
兩個都可以。
重組蛋白是利用重組DNA或重組RNA技術獲得的蛋白質。重組蛋白主要是指制藥工業中通過表達獲得的細胞因子、凝血因子或人工設計的蛋白質分子。
重組蛋白和天然蛋白有什麽區別?
重組蛋白通常由轉基因動物的乳腺產生,並且產生的重組蛋白作為生物藥物在醫學中發揮重要作用。利用基因工程技術,可以把哺乳動物本身變成“大規模生產藥物的工廠”。方法是將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因啟動子及其他調控成分重組,通過顯微註射的方式導入哺乳動物(哺乳動物可以泌乳)的受精卵中,然後將受精卵送入母體,使其生長發育成為轉基因動物。轉基因動物進入哺乳期後,可以通過分泌的乳汁產生所需的蛋白質藥物,因此被稱為動物乳腺生物反應器或* * *生物反應器。目前,科學家已經在牛和山羊的乳腺生物反應器中表達了抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素和α-抗胰蛋白酶。
什麽是融合蛋白?
基本介紹
融合蛋白有兩種不同的含義,壹種是通過DNA重組技術獲得的兩個基因的表達產物。另壹種含義是介導兩個質膜融合的組蛋白,如仙臺病毒脂雙層外小葉所含的兩種糖蛋白之壹,介導病毒包膜與宿主質膜的融合。另壹種糖蛋白是血凝素神經酰胺酶。
兩種不同蛋白質結合在壹起成為大分子。它可以通過化學方法或基因融合來連接。在基因操作中,壹些小分子的多肽基因往往通過融合的方式與壹個基因(如lac)相連,在它們之間切割壹種酶(如凝血酶)以增加體內表達後產物的穩定性,還有壹些故意將兩個分子串聯融合以提高療效,如IL-3和GM-CSF。還有與分泌蛋白的信號肽基因融合的基因,使表達產物可以分泌到膜外或胞外。
在基因工程快速發展的基礎上,有目的地將兩個或多個編碼功能蛋白的基因連接在壹起,然後表達所需的蛋白。將兩個或兩個以上基因的編碼區在人工條件下首尾相連,由同壹調控序列形成的控制基因表達的蛋白質產物稱為融合蛋白。
折疊編輯本段的相關技巧
折疊的技術特征
融合基因可在原核細胞(如大腸桿菌)和真核細胞中表達。原核表達系統具有時間短、成本低的特點,是科學研究中的主要工具。它的缺點是真* * *白表情沒有經過確切的修飾;大量蛋清往往沈澱成不溶性包涵體聚合物,需要復雜的變性和復性過程;很難分泌大量的蛋白質。真核表達系統的特點是蛋白質翻譯後加工機會多,甚至可以轉化成人源型;真核細胞易於轉染,具有遺傳穩定性和可重復性;產物可分泌,純化簡單,成本低。
折疊技術含量
1.克隆目的基因:根據基因序列互補的原理,設計合適的引物序列,以cDNA為模板,利用PCR技術擴增不同的目的DNA片段。
2.載體內重組:用限制性內切酶消化回收兩個DNA片段,然後用連接酶在體外連接兩個具有相同末端限制性位點的基因片段,克隆到高表達質粒載體中,構建重組質粒。
3.將重組表達載體轉染到宿主細胞中,用選擇標記進行篩選和測序。
4.融合基因的誘導表達及表達蛋白的純化。
折疊技術的關鍵
在融合蛋白的構建中,壹個關鍵問題是兩個蛋白之間的連接序列,即連接肽。它的長度對於蛋白質的折疊和穩定性非常重要。如果接頭序列太短,可能會影響兩種蛋白質更高級結構的折疊,從而相互幹擾;如果接頭序列太長,就涉及到免疫原性,因為接頭序列本身就是壹個新的抗原。
壹般來說,3-5個氨基酸的接頭可以滿足大多數融合蛋白正確折疊的要求。有人試圖在融合蛋白之間添加壹條疏水的、可延伸的肽鏈,如(Gly4Ser1),以便將它們分開,減輕相互幹擾,並獲得了滿意的結果。但是涉及到每壹種蛋白質,就需要具體分析了。在構建融合蛋白時,要選擇多種融合方法,優化理想的連接方式。此外,大量研究表明,為了不幹擾蛋白質的功能域,連接肽的柔性和疏水性非常重要。遺憾的是,對於連接肽序列的設計,目前還沒有可靠的選擇標準。目前,大多數連接肽序列的設計和選擇仍然主要依靠直覺。雖然依靠蛋白質的壹級結構來預測其二級結構已經取得了很大的進展,但是我們對序列和結構之間關系的認識仍然非常有限。
折疊編輯本段的臨床應用
折疊DNA疫苗
目前,疫苗已經經歷了三代:第壹代疫苗用減毒或滅活的病原體激活免疫系統;二代疫苗是利用生物技術和重組DNA技術研制的成分疫苗,通過註射入體內誘導免疫反應;第三代疫苗是DNA疫苗,通過直接註射重組抗原基序激活人體免疫系統。與傳統疫苗相比,DNA疫苗具有生產容易、穩定性強、成本低等明顯優勢,並能同時誘導體液和細胞免疫應答。
當前利用基數......
有必要將目的基因與乳腺蛋白基因的調控成分進行重組。
(1)基因工程需要大量的目的基因,獲得大量目的基因的常用方法是_ _ _ _。將目的基因導入奶牛受精卵最有效的方法是_ _ _ _。導入前需要將目的基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動子及其他調控成分進行重組,屬於基因工程“四步曲”中的_ _ _ _。如果基因工程的受體細胞是單子葉植物細胞,導入目的基因的常用方法是_ _ _ _。
(2)細胞工程和胚胎工程廣泛應用於動物培養過程中。在培育試管牛和克隆牛的過程中,前者的獨特技術是_ _ _ _ _,後者的獨特技術是_ _ _ _ _。如果需要快速獲得大量的優良牛,可以進行超數排卵,措施是給供體牛註射_ _ _ _ _,也可以分割早期胚胎,選擇已經發育到桑椹胚或囊胚期的胚胎進行手術。在分割囊胚期胚胎時,必須註意將早期胚胎中的_ _ _ _平均分割。
測試答案
(1)PCR技術構建基因表達載體顯微註射基因槍法(或花粉管通道法)
(2)將胞質內促性腺激素細胞移植到體外受精胚胎的細胞核內。